人脂蛋白脂肪酶(LPL)ELISA原裝進(jìn)口試劑盒用于測(cè)定血清、血漿及相關(guān)液體樣本中的含量。試劑盒嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試劑不同批號(hào)組分不得混用。

  ELISA法測(cè)定試劑盒參數(shù)規(guī)格：

 中文名稱：人脂蛋白脂肪酶(LPL)ELISA原裝進(jìn)口試劑盒

 規(guī)格：96T/48T

 性狀：液體

 存儲(chǔ)：4℃保存6個(gè)月

 運(yùn)輸方式：快遞發(fā)貨

 檢測(cè)標(biāo)本：血清，血漿，尿液，胸腹水，腦脊液，細(xì)胞培養(yǎng)上清，組織勻漿等

檢測(cè)方法：雙抗夾心法

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 試劑盒：大鼠Elisa試劑盒，小鼠Elisa試劑盒，人Elisa試劑盒，犬Elisa試劑盒，魚Elisa試劑盒，雞Elisa試劑盒，牛Elisa試劑盒、其他動(dòng)物類Elisa試劑盒、植物Elisa試劑盒、分子生物學(xué)試劑盒、 免疫組化試劑盒、金標(biāo)檢測(cè)試劑盒、生化試劑盒、細(xì)胞凋亡試劑盒。

 抗體：一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體；免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體�？贵w：一抗、二抗、進(jìn)口原裝抗體、進(jìn)口分裝抗體、單克隆抗體、多克隆抗體、單標(biāo)抗體、雙標(biāo)抗體、多標(biāo)抗體；免疫組化抗體、免疫細(xì)胞化學(xué)抗體、免疫熒光抗體、流式細(xì)胞抗體。

 動(dòng)物血清：內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。動(dòng)物血清：內(nèi)皮細(xì)胞專用血清、GIBCO胎牛清、HyClone。

 細(xì)胞：原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。細(xì)胞：原裝進(jìn)口細(xì)胞、正常細(xì)胞、腫瘤細(xì)胞、腫瘤耐藥細(xì)胞。

 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定enzyme linked immunosorbent assay（簡(jiǎn)寫ELISA）指將可溶性的抗原或抗體結(jié)合到聚苯乙烯等固相載體上，利用抗原抗體結(jié)合專一性進(jìn)行免疫反應(yīng)的定性和定量檢測(cè)方法。酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定（ELISA）為免疫學(xué)中的經(jīng)典實(shí)驗(yàn)。

 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒工作原理：

  1971年Engvall和Perlmann發(fā)表了酶聯(lián)免疫吸附劑測(cè)定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）用于IgG定量測(cè)定的文章，使得1966年開始用于抗原定位的酶標(biāo)抗體技術(shù)發(fā)展成液體標(biāo)本中微量物質(zhì)的測(cè)定方法。這一方法的基本原理是：①使抗原或抗體結(jié)合到某種固相載體表面，并保持其免疫活性。②使抗原或抗體與某種酶連接成酶標(biāo)抗原或抗體，這種酶標(biāo)抗原或抗體既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在測(cè)定時(shí)，把受檢標(biāo)本（測(cè)定其中的抗體或抗原）和酶標(biāo)抗原或抗體按不同的步驟與固相載體表面的抗原或抗體起反應(yīng)。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復(fù)合物與其他物質(zhì)分開，最后結(jié)合在固相載體上的酶量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量成一定的比例。加入酶反應(yīng)的底物后，底物被酶催化變?yōu)橛猩�產(chǎn)物，產(chǎn)物的量與標(biāo)本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān)，故可根據(jù)顏色反應(yīng)的深淺刊物定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，故可極大地放大反應(yīng)效果，從而使測(cè)定方法達(dá)到很高的敏感度。

 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒使用方法:

 夾心法

 夾心法常用于檢測(cè)大分子抗原，一般之操作步驟為：

  1、將具有專一性之抗體固著（coating）于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體；

  2、加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)之抗原，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)；

  3、洗去多余待測(cè)檢體，加入另一種對(duì)抗原專一之一次抗體，與待測(cè)抗原進(jìn)行鍵結(jié)；

  4、洗去多余未鍵結(jié)一次抗體，加入帶有酵素之二次抗體，與一次抗體鍵結(jié)；

  5、洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酵素受質(zhì)使酵素呈色，以肉眼或儀器讀取呈色結(jié)果。

 間接法

 間接法常用于檢測(cè)抗體，一般之操作步驟為：

  1、將已知之抗原固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余之抗原；

  2、加入待測(cè)檢體，檢體中若含有待測(cè)之一次抗體，則其會(huì)與塑膠孔盤上的抗原進(jìn)行專一性鍵結(jié)；

  3、洗去多余待測(cè)檢體，加入帶有酵素之二次抗體，與待測(cè)之一次抗體鍵結(jié)；

  4、洗去多余未鍵結(jié)二次抗體，加入酵素受質(zhì)使酵素呈色，藉儀器（ELISA reader）測(cè)定塑膠盤中的吸光值（OD值），以評(píng)估有色終產(chǎn)物的含量即可測(cè)量待測(cè)抗體的含量。

 競(jìng)爭(zhēng)法

 競(jìng)爭(zhēng)法是一種較少用到的ELISA檢測(cè)機(jī)制，一般用于檢測(cè)小分子抗原，其操作步驟為：

  1、將具有專一性之抗體固著于塑膠孔盤上，完成后洗去多余抗體；

  2、加入待測(cè)檢體，使檢體中的待測(cè)抗原與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)；

  3、加入帶有酵素之抗原，此抗原也可與塑膠孔盤上的抗體進(jìn)行專一性鍵結(jié)，由于塑膠孔盤上固著的抗體數(shù)量有限，因此當(dāng)檢體中抗原的量越多，則帶有酵素之抗原可鍵結(jié)的固著抗體就越少，亦即，兩種抗原皆競(jìng)相與塑膠孔盤上抗體鍵結(jié)，即所謂競(jìng)爭(zhēng)法之由來；

  4、洗去檢體與帶有酵素之抗原，加入酵素受質(zhì)使酵素呈色，當(dāng)檢體中抗原量越多，代表塑膠孔盤內(nèi)留下之帶有酵素的抗原越少，顯色也就越淺。

 當(dāng)需要偵測(cè)無法獲得兩種以上單一性抗體的抗原，或是不易得到足夠的純化抗體以固著于孔盤上時(shí)，一般會(huì)考慮使用競(jìng)爭(zhēng)法ELISA。

 酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒結(jié)果判斷：

 定性測(cè)定

 定性測(cè)定的結(jié)果判斷是對(duì)受檢標(biāo)本中是否含有待測(cè)抗原或抗體作出"有"或"無"的簡(jiǎn)單回答，分別用"陽性"、"陰性"表示。"陽性"表示該標(biāo)本在該測(cè)定系統(tǒng)中有反應(yīng)。"陰性"則為無反應(yīng)。用定性判斷法也可得到半定量結(jié)果，即用滴度來表示反應(yīng)的強(qiáng)度，其實(shí)質(zhì)仍是一個(gè)定性試驗(yàn)。在這種半定量測(cè)定中，將標(biāo)本作一系列稀釋后進(jìn)行試驗(yàn)，呈陽性反應(yīng)的最高稀釋度即為滴度。根據(jù)滴度的高低，可以判斷標(biāo)本反應(yīng)性的強(qiáng)弱，這比觀察不稀釋標(biāo)本呈色的深淺判斷為強(qiáng)陽性、弱陽性更具定量意義。

 在間接法和夾心法ELISA中，陽性孔呈色深于陰性孔。在競(jìng)爭(zhēng)法ELISA中則相反，陰性孔呈色深于陽性孔。

 定量測(cè)定

  ELISA操作步驟復(fù)雜，影響反應(yīng)因素較多，特別是固相載體的包被難達(dá)到各個(gè)體之間的一致，因此在定量測(cè)定中，每批測(cè)試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測(cè)定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA，標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬，曲線最高點(diǎn)的吸光度可接近2.0，繪制時(shí)常用半對(duì)數(shù)紙，以檢測(cè)物的濃度為橫坐標(biāo)，以吸光度為縱坐標(biāo)，將各濃度的值逐點(diǎn)連接，所得曲線一般呈S形，其頭、尾部曲線趨于平坦，中央較呈直線的部分是最理想的檢測(cè)區(qū)域。

 測(cè)定小分子量物質(zhì)常用競(jìng)爭(zhēng)法，其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測(cè)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線注意圖中橫坐標(biāo)為對(duì)數(shù)關(guān)系，這更有利于測(cè)定系統(tǒng)的表達(dá)。

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