人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA檢測試劑盒
中文名稱：人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA檢測試劑盒英文名稱：Human glomerular basement membrane antibogy,GBM elisa試劑盒
標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運(yùn)輸方面：現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
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從標(biāo)本收集、保存、預(yù)試驗(yàn)、實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)分析等全實(shí)驗(yàn)過程提供完整的技術(shù)指導(dǎo)。人抗腎小球基底膜抗體(GBM)ELISA檢測試劑盒ELISA試劑盒最新批次大量現(xiàn)貨，歡迎選購：
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人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒
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主要成分:酶標(biāo)板,試劑,標(biāo)準(zhǔn)品等
性狀：盒裝液體
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)標(biāo)本：血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
ELISA試劑盒種屬齊全：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
產(chǎn)品運(yùn)輸方面：部分現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運(yùn)輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨
2、檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
3、服務(wù)承諾：工作時(shí)間內(nèi)免費(fèi)技術(shù)咨詢和指導(dǎo)，提供來樣檢測及免費(fèi)代測服務(wù)，保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的有效性。
4、研究領(lǐng)域：炎癥研究、神經(jīng)生物學(xué)、腫瘤研究、新陳代謝、信號(hào)通路、免疫學(xué)、傳染病、其他研究。
如果人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒所檢測的樣本不是連續(xù)的，所以實(shí)驗(yàn)中不用的板條立即放回包裝中，密閉封口，4℃可保存1個(gè) 月。其余不用試劑應(yīng)包裝好或蓋好。在做樣本檢測前要有一個(gè)完整的計(jì)劃，如標(biāo)本編號(hào)、所測項(xiàng)目、目的等。操作時(shí)盡量使用一次性的吸頭，避免交叉污染。
主要分為以下系列：
1、細(xì)胞因子檢測試劑盒
2、內(nèi)分泌檢測試劑盒
3、肝纖維化檢測試劑盒
4、心肌梗塞檢測試劑盒
5、腫瘤標(biāo)志物檢測試劑盒
6、自身免疫檢測試劑盒
7、優(yōu)生優(yōu)育檢測試劑盒
8、傳染病檢測試劑盒等等。
人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒操作步驟
方法一 用于檢測未知抗原的雙抗體夾心法:
1. 包被：用0.05M PH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個(gè)聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml，4℃過夜。次日，棄去孔內(nèi)溶液，用洗滌緩沖液洗3次，每次3分鐘。(簡稱洗滌，下同)。
2. 加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中，置37℃孵育1小時(shí)。然后洗滌。(同時(shí)做空白孔，陰性對(duì)照孔及陽性對(duì)照孔)。
3. 加酶標(biāo)抗體：于各反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃孵育0.5～1小時(shí)，洗滌。
4. 加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml，37℃10～30分鐘。
5. 終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定：可于白色背景上，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強(qiáng)，陰性反應(yīng)為無色或極淺，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”、“-”號(hào)表示。也可測O·D值：在ELISA檢測儀上，于450nm(若以ABTS顯色，則410nm)處，以空白對(duì)照孔調(diào)零后測各孔O·D值，若大于規(guī)定的陰性對(duì)照OD值的2.1倍，即為陽性。
方法二 用于檢測未知抗體的間接法：
用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃過夜。次日洗滌3次。加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中，加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml，37℃孵育30-60分鐘，洗滌,最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒注意事項(xiàng)
1. 正式試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)分別以陽性對(duì)照與陰性對(duì)照控制試驗(yàn)條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。有時(shí)本底較高，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清、兔血清或BSA等封閉。
2. 在人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中，選擇好各項(xiàng)ELISA實(shí)驗(yàn)條件是很重要的，其中包括:
(1) 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進(jìn)行篩選：用等量抗原包被，在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng)，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
(2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí)，要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時(shí)間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時(shí)。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進(jìn)行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg/ml等)進(jìn)行包被后，在其它試驗(yàn)條件相同時(shí)，觀察陽性標(biāo)本的OD值。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對(duì)于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg/ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進(jìn)行初步效價(jià)的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份)。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對(duì)供氫體的選擇要求是價(jià)廉、安全、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護(hù)。有條件者應(yīng)使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體。底物作用一段時(shí)間后，應(yīng)加入強(qiáng)酸或強(qiáng)堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時(shí)間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
凡購人抗腎小管基底膜抗體(TBM)ELISA試劑盒等潤裕生物ELISA試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品等試劑產(chǎn)品，公司專業(yè)技術(shù)團(tuán)隊(duì)全程提供免費(fèi)技術(shù)支持與指導(dǎo)，只需來樣即可為您免費(fèi)代測，可測定血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量或者活性表達(dá)。潤裕生物專業(yè)為您提供ELISA試劑盒價(jià)格，規(guī)格，用途，說明書等操作說明詳情可來電咨詢，歡迎訂購。
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使用方法:
1、選取有代表性的蔬菜樣品，擦去表面泥土，剪成1cm左右見方碎片，取5g放入帶蓋瓶中，加入10mL純凈水或緩沖溶液，震搖50次，靜置2min以上。
2、取一片速測卡，撕去上蓋膜，用白色藥片沾取提取液，放置10min以上進(jìn)行預(yù)反應(yīng)，有條件時(shí)，在37℃恒溫裝置中放置10min。預(yù)反應(yīng)后的藥片表面必須保持濕潤。
3、將速測卡對(duì)折，用手捏3min或用恒溫裝置恒溫3min，使紅色藥片與白色藥片疊合發(fā)生反應(yīng)。根據(jù)白色藥品的顏色變化判讀結(jié)果。
4、每批測定應(yīng)設(shè)一個(gè)純凈水或緩沖液的空白對(duì)照卡。
結(jié)果判定：
與空白對(duì)照卡比較，白色藥片不變色或略有淺藍(lán)色均為陽性結(jié)果，不變藍(lán)為強(qiáng)陽性結(jié)果，說明農(nóng)藥殘留量較高，顯淺藍(lán)色為弱陽性結(jié)果，說明農(nóng)藥殘留量相對(duì)較低。白色藥片變?yōu)樘焖{(lán)色或與空白對(duì)照卡相同，為陰性結(jié)果。 對(duì)陽性結(jié)果的樣品，可用其它分析方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。
保存條件:
陰涼、干燥、避光保存，有條件者放于4℃冰箱中最佳。農(nóng)藥速測卡開封后最好在三天內(nèi)用完，如一次用不完可存放在干燥器中，一周內(nèi)用完。保質(zhì)期1年。
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