人白介素10(IL-10)ELISA KIT
僅供研究使用 一、試劑組成 1、精密度微孔板MicrotestPlates96wells2、酶標偶合液EnzymeConjugate12.0ml 3、標準品Standard5x1.0ml4、呈色劑A、SubstrateA6.0ml 5、呈色劑B、SubstrateB6.0ml6、終止液StopSolution6.0ml 7、濃縮洗滌液(1:20)RinsingBuffer60.0ml8、5倍樣品稀釋液dilution15.0m 二、注意事項 1.此試劑為體外檢測試劑,效期內使用,試劑應視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用! 2.使用前應將盒內各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。 3.保存于2-8℃,請勿冷凍,期請見盒內標示! 4.濃縮洗滌液出現(xiàn)結晶后,請于37℃孵育15分鐘 三、操作步驟 1.每孔分別加入已稀釋的樣品、標準品各100ul。 2.將板置于37℃溫育30分鐘! 3.甩盡板中液體,用應用洗滌液進行洗滌,每次停留30秒,在紙上拍干。重復操作5次! 4.每孔加入酶標偶合液100ul! 5.將板置于37℃溫育30分鐘! 6.甩盡板中液體,用應用洗滌液進行洗滌,每次停留30秒,在紙上拍干。重復操作5次。 7.每孔加底物A、底物B各50ul,置37℃恒溫箱反應15分鐘! 8.每孔加終止液50ul,于450nm波長讀O.D.值!
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小鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實驗(ELISA).已知待測物質濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將待測物質和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中待測物質的濃度呈比例關系。
小鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒試劑盒內容及其配制
小鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒自備材料1)蒸餾水。2)加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3)振蕩器及磁力攪拌器等。
小鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒安全性1)避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。2)實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3)不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
小鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒操作注意事項1)試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。2)實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。3)不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6)洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7)底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8)加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9)按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
小鼠白介素10(IL-10)ELISA檢測試劑盒樣品收集、處理及保存方法1)血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2)血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3)細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4)組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液5)保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
KH-E10155 | 人白介素10(IL-10)elisa試劑盒 |
96T/48T產品資料:
檢測范圍: 96T
12ng/L-480ng/L
應用領域:
本試劑盒用于測定人血清、血漿及相關液體樣本中腫瘤壞死因子α(TNF-α)含量。
工作原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人腫瘤壞死因子α(TNF-α)水平。用純化的人腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入腫瘤壞死因子α(TNF-α),再與HRP標記的腫瘤壞死因子α(TNF-α)抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的腫瘤壞死因子α(TNF-α)呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中人腫瘤壞死因子α(TNF-α)濃度。
KH-E10001 人原鈣黏素1(PCDH1)elisa試劑盒 96T/48T 試劑盒組成
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標準品(720ng/L) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標準品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個 |
標本要求
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融
2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
KH-E10001 人原鈣黏素1(PCDH1)elisa試劑盒 96T/48T 操作流程:
1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
360ng/L | 5號標準品 | 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液 |
180ng/L | 4號標準品 | 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
90ng/L | 3號標準品 | 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
45ng/L | 2號標準品 | 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
22.5ng/L | 1號標準品 | 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液 |
2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
操作程序總結:
計算
以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據(jù)樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實際濃度。
KH-E10001 人原鈣黏素1(PCDH1)elisa試劑盒 96T/48T 注意事項:
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔第一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
保存條件及有效期
1.試劑盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6個月
公司介紹: 上海森雅生物技術有限公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、儀器耗材的公司,經(jīng)過多年不懈的努力,已成為國內生命科學領域產品的主要供應商之一,自主研發(fā)的elisa試劑盒更是具有國內頂尖的技術水平。公司的服務和業(yè)務網(wǎng)絡遍及全國,在同行獲得一致好評。 特別是生物試劑和細胞產品更是種類齊全、價格實惠,美國原裝進口原代細胞,專業(yè)培養(yǎng)基,常用傳統(tǒng)培養(yǎng)基,細胞培養(yǎng)用的相關試劑,對照品標準品,科研抗體抗原,生化試劑產品品種齊全,試劑耗材種類繁多。并代理國內外許多著名品牌等等。 公司的規(guī)模和產品種類日益擴大和更新,我們一直秉承著代理優(yōu)質品牌的產品,服務好每一位顧客,將最新的科學技術和方法推薦顧客的服務宗旨為廣大客戶提供各類服務,產品、技術咨詢、國際國內信息,每年組織大批員工出國學習,掌握國際先進的技術和信息。 公司的宗旨是:為客戶提供質量的產品,的技術服務!
產品別名:人白介素10(IL-10)定量檢測試劑盒,人白介素10(IL-10)酶聯(lián)免疫分析試劑盒
英文縮寫:IL-10 Elisa Kit
規(guī)格96T/48T
存儲條件:2-8℃
有效期:6個月
特異性:本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的,且與其他相關蛋白無交叉反應。
檢測種屬:人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。
適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床
供應人白介素10(IL-10)elisa試劑盒等ELISA試劑盒操作技術相關的注意事項:
⑴ 嚴格按照供應人白介素10(IL-10)elisa試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
⑵ 加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
(3)封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產生周邊現(xiàn)象從而導致“花板”的出現(xiàn)。
(4)用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后最好在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現(xiàn)象而導致“花板”的出現(xiàn)。
(5)合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
(6)加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
(7)顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
(8)加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
(9)應保證C清潔,整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸。以上的措施可以使“花板”降至最低限度。從而提高檢測的特異性。并得到更準確、可靠的實驗結果。
供應人白介素10(IL-10)elisa試劑盒等潤裕生物ELISA試劑盒產品,原裝ELISA試劑盒以及各類國產ELISA試劑盒產品8折優(yōu)惠熱銷中,歡迎廣大科研學者前來選購:
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大鼠白介素10(IL-10)試劑盒 上海一基實業(yè)科技有限公司主要從事實驗室設備,免疫學、分子生物學和常規(guī)生化試劑的研發(fā)、銷售。并代理銷售多個國外知名品牌,致力于為廣大高校、科研院所和企事業(yè)單位提供一流的科研試劑和完善的技術服務。歡迎來電咨詢
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大鼠白介素10(IL-10)試劑盒
大鼠白介素10(IL-10)elisa試劑盒 參數(shù):
編號 | 中文名稱 | 英文名稱 | 規(guī)格 |
F4039-A | 大鼠白介素10(IL-10)elisa試劑盒 | Rat Interleukin 10,IL-10 elisa KIT | 48T |
大鼠白介素10(IL-10)elisa試劑盒 技術流程ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。然而,影響Elisa試驗結果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。
主要優(yōu)點1、簡易操作、高效、靈敏、特異的抗體;2、穩(wěn)定的重復性和可靠性;3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;5、節(jié)省實驗經(jīng)費。
使用方法1、 血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。2、 血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、 細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。5、 保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。操作步驟1:雙抗體夾心法1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。6. 結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。操作步驟2:間接法1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過夜;2.次日洗滌3次;3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌;4.(同時做空白、陰性及陽性孔對照)于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.1ml;5.37℃孵育30-60分鐘,洗滌;6.’最后一遍用DDW洗滌。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5、6。
標本要求1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融2.不能檢測含NaN3 的樣品,因NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
應用信息ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現(xiàn)已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據(jù)已經(jīng)使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。因此ELISA法在生物醫(yī)學各領域的應用范圍日益擴大,可概括四個方面:1、免疫酶染色各種細胞內成份的定位。2、研究抗酶抗體的合成。3、顯現(xiàn)微量的免疫沉淀反應。4、定量檢測體液中抗原或抗體成份。編輯本段進口分裝進口分裝:檢測范圍和靈敏度不同,用量少時,可使用分裝,前期是它的長久性不是很好。試劑盒的標準曲線最高點OD 值均在2.0±0.2,零孔的OD 值都控制在0.10以下。試劑盒的標準曲線相關系數(shù)R≥0.99。試劑盒重復性好,板內、板間變異系數(shù)均小于9 %。試劑的組份都多給20%的富余量,確保完成48/96孔的檢測,避免分次檢測可能造成試劑量不足的情況。檢測抗體及酶結合物的稀釋度合適(均為1:30), 方便試驗操作者準確地做稀釋工作,保證實驗結果的重復性。白介素6是一種細胞因子,已被證實為B細胞分化因子.它是一種抗體形成系統(tǒng),它的生理特性,如肝細胞急性蛋白合成的誘導和基于和白介素3協(xié)同作用的生長刺激等,也備受關注. 并且已證實白介素-6與病理學存在穩(wěn)定的相關關系.例如,報道多種疾病的生長因子為白介素-6, 骨髓瘤細胞能合成白介素-6并表達白介素-6受體.此外, 白介素6在多種炎性疾病和自身免疫疾病發(fā)揮重要的作用. 此試劑盒能高靈敏度的檢測小鼠血清和細胞基質上清的白介素6 原理 此試劑盒運用了兩種特異性抗體,洗板后加入TMB底物液顯色,顯色的強度與小鼠的白介素-6的量成正比. 檢測范圍 10.94 700 pg/mL [2]預期用途此IBL試劑盒能用于小鼠血清,EDTA血漿,細胞上清中白介素-6的定量檢測試劑盒成分1 預包被板: 抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 96T2 酶標記抗體: (30倍濃縮)HRP標記抗小鼠白介素-6兔子IgG,親合純化 0.4mL x 13 標準品: 重組小鼠白介素-6 0.5mL x 2 4 EIA緩沖液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 30mL x 15 標記抗體稀釋液: 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 12mL x 16 顯色劑: TMB底物液 15mL x 17 終止液: 1N硫酸 12mL x 18 濃縮洗滌液: (40倍濃縮) 含1% BSA, 0.05%吐溫20 BPS 50mL x 1 操作說明 1實驗所需器材(但試劑盒沒有提供) 酶標儀(450nm) 微移液管及其吸嘴 量筒及燒杯 去離子水 冰箱(4°C) 坐標紙(log/log) 吸水紙 試管(用于標準品稀釋) 溫育箱(37°C ± 1°C) 洗瓶 (用于洗板) 一次性試劑管(用于濃縮酶標記抗體和顯色劑)[3]
注意事項1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經(jīng)常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間最好控制在5 分鐘內,如標本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。4. 請每次測定的同時做標準曲線,最好做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD 值大于標準品孔第一孔的OD 值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n 倍)后再測定,計算時請最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物請避光保存。7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9.本試劑不同批號組分不得混用。10.保存條件及有效期:1.試劑盒保存:;2-8℃。2.有效期:6 個月